实验八　半抗原标记cRNA探针原位杂交组织化学染色

CRNA探针为单链探针，杂交时不需变性。虽由于黏性较DNA探针强，易与组织发生较高水平的非特异性结合，但可通过在杂交后漂洗液中加入RNA酶对其降解。因此， cRNA探针在检测组织细胞内mRNA表达的原位检测中得到广泛应用，其中用半抗原标记的cRNA探针最为常用。在以体外转录方式合成cRNA探针时，如在转录体系中加入地高辛标记的rNTP原料，则能合成带有地高辛的cRNA探针，其中与待测mRNA序列互补的反义cRNA探针按照碱基配对原则与待测mRNA结合形成杂交体，然后用碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体与杂交体上 ......