三、冷冻切片

在准备冷冻切片的过程中，为了保留良好的组织结构和抗原性，几个步骤是很关键的。由于反复冻融会引起组织进一步的损伤和抗原性的丢失，组织应该持续保存在冷冻的状态。4～5 μ m的冷冻切片在空气中干燥4～24小时，接着在丙酮中固定15～30分钟，然后在氯仿中浸泡15～30分钟。如上面所讲的在丙酮和氯仿中固定。对于一些涉及细胞因子的染色过程，用多聚甲醛或皂苷固定最佳。空气中干燥的涂片置于4%的溶于不含NaCl的磷酸盐缓冲液的多聚甲醛中（pH7.4～7 ﹒。6），接下来在0.1%的皂苷（溶于PBS）中洗脱膜上的胆固醇 ......