五、通过CFSE标记的流式细胞术测定淋巴细胞分布

这种实验方法是Lyons和Parish于1994年提出的方法的改进，用于测定刺激后的初级T细胞或T细胞系的增殖。用HBSS通过尼龙膜提纯T细胞。重悬细胞于含终浓度0.2μM CFSE的HBSS中,细胞浓度约10 7／ml。将细胞于37℃水浴15分钟。离心收集细胞,用10倍体积的HBSS洗3次。于细胞培养基中重悬细胞使其浓度达5×10 6/m l。用5μg/m l的ConA刺激细胞。于含IL‐2的完全培养基中孵育48小时。将生物素标记的一抗或二抗与抗生物素蛋白链菌素‐R‐藻红蛋白孵育。将5×10 6～10× ......