[患者教育]第三节 真核细胞DNA 的制备

制备染色体DNA，首先要破碎组织，裂解细胞，并破坏蛋白质与DNA的结合，使DNA释放出来。细胞裂解液中的EDTA、SDS和蛋白酶K等都具有上述作用，并能有效地抑制DNA酶活力。然后可通过酚和氯仿抽提去除蛋白质、脂类、多糖等杂质，通过RNase A消化去除RNA。最后用乙醇沉淀DNA。2 ﹒蛋白酶K，用灭菌水配制成20mg／ml。1 ﹒培养细胞收集培养细胞，用冰预冷的PBS缓冲液洗涤两次，用TE缓冲液重悬细胞至5 × 107／ml，每毫升细胞悬液加入10ml抽提液，于37℃水浴温育1小时，随后进行步骤2。采 ......