第二节 DNA链末端合成终止法

DNA链末端合成终止法也称Sanger法，是Sanger于1977年建立的一种测定DNA序列的方法，是目前应用最为广泛的方法。DNA链末端合成终止法测序是使用均一单链DNA模板和一种适当的DNA合成引物，在DNA聚合酶作用下，合成DNA模板的互补链，利用放射性核素标记的双脱氧核苷三磷酸（dideoxynucleoside triphosphate，ddNTP）作底物使DNA链的合成发生特异性终止。合成出一系列以放射性核素标记的相应ddNTP为3 ′末端的不同长度的新生链。适当降低ddNTP和dNTP的浓度 ......