[辅助检查]三、cDNA的合成

从真核生物的组织或细胞中提取mRNA，通过酶促反应反转录合成cDNA的第一链和第二链，将双链cDNA和载体连接，然后转化扩增，即可获得cDNA文库，构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析。同mRNA互补的DNA称为cDNA，cDNA文库的构建过程可粗分为总RNA的提取，mRNA的纯化，cDNA的合成以及将cDNA克隆入载体等几个主要步骤，其中cDNA的合成是其中最复杂也是文库建立成败的关键步骤。合成的cDNA也可以经PCR扩增后再克隆入适当载体。 ......