过氧化物酶法,当组织来源是小鼠时,一抗极有可能用大鼠的单克隆抗体或兔的多克隆抗血清。以下是用辣根过氧化物酶(HRP)方法时对一抗和二抗的描述。孵育过程中,将切片用TBS在染缸中冲洗两次,用纸巾去除多余的液体。2 ﹒在切片用一抗孵育前,通过将切片在不透光的染缸中用1%H 2 O 2 TBS预孵育20分钟以阻断组织中内源性过氧化物酶的活性。3 ﹒将兔抗血清或大鼠多克隆抗体加入到TBS(含10%FCS)中,稀释到合适浓度,孵育30分钟(为找到合适的一抗浓度,将一抗进行3倍的系列稀释以优化背景和特异性染色的对比度 ......