[辅助检查]二、荧光定量方法及其特点

荧光染料法是利用荧光染料与DNA双链的结合而被染色。荧光染料能结合在DNA双链结构的小沟中，而游离的荧光染料不发出荧光，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加相符。目前，用于实时荧光定量PCR的荧光分子主要有PicoGreen和SYBR Green Ⅰ。不足之处是检测特异性仅依赖于引物特异性，当PCR反应中有非特异性扩增时，荧光染料也可与非特异性dsDNA产物（如引物二聚体）结合，产生荧光干扰，使实验容易产生假阳性信号。另外一种水解探针为MGB探针MGB2ODN，它与TaqMan探针相比能更好地稳定探针 ......