[辅助检查]第三节 多基因的拼接

分子生物学实验中，经常会遇到需要把多个基因片段连在一起的情况，比如利用人工合成的寡核苷酸片段构建成完整的长片段基因，构建多效价复合疫苗，真核基因多个外显子的拼接等。常规的方法是在各片段两端设计不同的限制性内切酶识别位点，PCR法获得基因片段，分别使用不同的限制性内切酶酶切后，将DNA片段使用连接酶连接。这种常规方法操作较为繁琐，引入的酶切识别序列有时会造成框移突变，影响后续实验研究．以下我们将介绍四种常用基因拼接法的原理与步骤。 ......