[辅助检查]第八节 载体质粒的制备与目的基因的亚克隆

克隆载体：携带外源DNA，在受体细胞中能够自我复制，但不表达。质粒：作为基因克隆的常用载体分子，主要是因为可获得大量纯化的质粒DNA分子。以下介绍热震惊法，通过这种方法，每μ g超螺旋质粒DNA产生5 × 106～2 × 107个菌落，这样的转化效率足以满足所有在质粒中进行的常规克隆的需要。加入适量质粒(50～100ng),轻轻混匀，冰浴20min。根据质粒性质所添加的抗生素或(和)X‐Gal/IPTG进行重组子的挑选。例如蓝白斑筛选中带有重组质粒的细菌形成的是白色菌落。 ......