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[辅助检查]三、目的DNA与适宜载体连接形成重组DNA(接)

依据目的DNA和线性化载体末端的特点,可采用不同的连接策略。主要连接策略如下。如果目的DNA末端为平端,便可在T4 DNA连接酶的作用下,将人工接头加在目的DNA的平端上,然后用相应的限制性内切酶切割人工接头产生黏端,进而连接到用相同限制性内切酶线性化的载体上。针对目的DNA的5 ′和3 ′端,设计一对特异引物,在每条引物的5 ′端分别加上不同的限制性内切酶位点,然后以目的DNA为模板,经PCR扩增便可得到带有引物序列的目的DNA,进而用相应限制性内切酶切割PCR产物,产生黏端,随后便可与带有相同黏端的线 ......

——《生物化学与分子生物学》
书名:《生物化学与分子生物学》
栏目:生物化学与分子生物学 > 第五篇 DNA操作 > 第二十四章 重组DNA技术 CHAPTER 24 RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY > 第四节 DNA克隆的基本过程 Section 4 Procedure of DNA Cloning
作者:贾弘禔 冯作化
参编:屈伸,药立波,方定志,冯涛,方定志
页码:484-485
版本:2
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-08-01
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