第十节 蛋白质的分离纯化与鉴定方法

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤：材料的预处理及细胞破碎。分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。这种方法简单方便，但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。比较方便的有效方法是根据蛋白质溶解度的差异进行的分离。中性有机溶剂如乙醇、丙酮，它们的介电常数比水低，能使大多数球状蛋白质在水溶液中的溶解度降低，进而从溶液中沉淀出来，因此可用来沉淀蛋白质。用等电点沉淀法、盐析法所得到的蛋白质一般含有其他蛋白质杂质，须进一步分离提纯才能得到有一定纯度的样品。有时还需要这几种方法联合使用才能得到较高纯度的蛋白质样品。