[速览]五、抗原决定部位指认

Zhao等建立了一种质谱法，可快速指认束缚在单克隆抗体的蛋白中的线型抗原决定部位。抗体蛋白可由蛋白水解酶水解，产生适当序列的肽段，包含线型抗原决定部位的肽段用单克隆抗体进行免疫沉淀而从肽段中筛选出，经过免疫沉淀的肽用MALDI‐TOF‐MS进行鉴定。为了鉴定抗原决定部位，完整蛋白在生理条件下被亲和束缚在一个固相的单克隆抗体上。将各种不同的蛋白水解酶结合进行切割可去除未被保护的残基。用MALDI‐TOF‐MS可测定抗原与抗体相连接并受保护以免发生蛋白水解的部位。对于产生心肌梗死、肌红蛋白、肌钙蛋白T的抗原决定部位结构鉴定，展示了一种不需要对单克隆抗体事先进行固化的方法。