1980年,Gorden首先建立了前核显微注射的转基因方法。Gordon将疱疹病毒胸腺激酶基因克隆于p BR322载体(启动子是SV40基因的启动子),前核显微注射到小鼠受精卵,再将受精卵移植到假孕母鼠输卵管中,产生了第一例转基因小鼠,这说明外源基因能够整合到哺乳动物胚胎染色体上。应用以ES细胞培养技术和同源重组为基础的基因敲入法(knock‐in),可将外源基因整合到特定的靶位点,利用靶位点全套的表达调控元件以实现特异性表达。