一、免疫共沉淀

免疫共沉淀（co‐immunoprecipitation）是利用抗体和抗原之间作用的特异性，研究两种蛋白质在完整细胞内相互作用的经典方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，许多蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也沉淀下来。融合表达的带有蛋白标签的特异性抗体与目标蛋白质或蛋白复合物结合，形成蛋白复合物沉淀，将蛋白质复合物分解，再通过对蛋白标签具有特异吸附作用的亲和色谱柱将蛋白复合物分离纯化出来，通过二维电泳、SDS‐PAGE或质谱等技术鉴定分离得到的蛋白。尽管该方法存在一定的局限性，但目前它仍然是验证蛋白质间相互作用最常规的手段之一，应用较为广泛。