例15﹒毛细管电泳‐电致化学发光法测定人尿中脯氨酸和羟脯氨酸

尿Pro和Hyp以游离态和结合态两种形式存在，可直接测定尿中游离Ρ ro和Hyp。通过样品处理、水解尿蛋白后，还可测定尿中游离态和水解的Pro和Hyp（简称为总Pro和Hyp），这有助于为全面诊断病情提供参考。测定人尿中游离Pro和Hyp:取人新鲜尿样500 μ l于1.5ml离心管中，加入500 μ l浓度1g／ml三氯乙酸充分震荡5min，使尿蛋白沉淀，再10000r／min离心10min，取上清液滤膜过滤后直接测定。由于人尿中这些物质的含量均低于允许量，因此上述多种氨基酸不干扰Pro和Hyp的测定。人尿样经处理后进行测定，得到CE‐ECL谱图，见图21‐23。样品测定后在其中添加适量Pro和Hyp的标准液进行回收实验。