一定量稀释的卡介菌接种于适宜的固体培养基培养一定时间后,由生长的菌落数及稀释度计算每mg(或每ml)中所含的活菌数。1)盐溶液制备:称取磷酸二氢钾4.4g、枸橼酸镁1.1g、硫酸镁1.1g、味精1.32 g、甘油20 ml,补充注射用水至1000 ml,过滤、分装三角瓶,以115℃高压蒸气灭菌20分钟。接种稀释度应适宜,如菌落形成过多或过少,则应重选稀释度复试。欧洲药典》及《WHO规程》方法:以适宜固体培养基培养法测定每ml供试疫苗悬液的活菌数,并介绍用生物发光反应测定三磷酸腺苷(ATP)作为快速活力测定,因为ATP只存在于活细胞,死细胞中ATP已被破坏,故ATP含量可用以评价活菌数,同时用参考品做平行试验对照。
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