这一方法的主要步骤是利用放射性同位素标记的配体与含有受体的组织、细胞膜、细胞浆或纯化的受体蛋白一起孵育,使受体与配基充分结合,形成复合物,直至达到平衡,然后除去未结合的游离配基,测定与受体结合的放射性配基。在实验中,需要考虑以下几方面。受体结合实验的最后一步是将经过孵育、结合反应已达到稳态平衡后,将孵育液中的放射性配体‐受体复合物与游离的放射性配体分离,以测定与受体结合的放射性配体的量。一般来说,过滤法适用于受体‐配体结合反应Kd ≤ 10nmol/L的情况,离心法适用于Kd为10~1000nmol/L的情况,而平衡透析法则适用于Kd > 1000nmol/L的情况。
……