为了得到满意的分离效果,装柱的步骤是非常关键的,将直接影响分离效果。湿法装柱:将脱脂棉放入色谱柱底部,并加入少量洗脱剂使其塞紧,然后将吸附剂用洗脱剂中极性最低的洗脱剂调成糊状,将其边敲打边倒入柱中,同时,打开下旋活塞,在色谱柱下面用干燥的锥形瓶进行接收洗脱剂。当装入的吸附剂有一定高度时,洗脱剂下流速度变慢,待所有吸附剂全部装完后,用流下来的洗脱剂转移残留的吸附剂,并将柱内壁残留的吸附剂淋洗下来。也可以采用梯度洗脱,即先采用极性小的洗脱剂,然后逐渐加大洗脱剂的极性,使洗脱剂的极性在柱中形成梯度。
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