B细胞在刺激因子(多克隆抗体、LPS、丝裂原等)的刺激下发生母细胞转化,利用3H标记胸苷并整合进入分裂的细胞中,测定标记细胞的放射强度就能客观反映淋巴细胞对刺激的应答水平。常用的刺激因子很多,这里介绍抗Ig抗体(抗Ig M或抗Ig G)和LPS作为刺激因子检测B细胞增殖能力的操作过程。2.B细胞和刺激因子共孵育的最佳时间在不同的实验有所不同,但通常24~48小时在大多数实验中能获得理想结果,在这一时间段中,观察到的大细胞或细胞团提示为健康增殖的B细胞,而小的颗粒细胞提示细胞接近死亡。4.3H标记胸苷的孵育结束后可以将96孔板冻存于- 20℃,方便的时候进行闪烁计数。
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