经干燥后的菌体,其细胞膜的渗透性发生变化,同时部分菌体产生自溶,然后用丙酮、丁醇或缓冲液等溶剂处理时,胞内物质就会被抽提出来。酵母菌常用空气干燥,在25~30℃的热空气流中吹干,部分酵母产生自溶,再用水、缓冲液或其他溶剂抽提时,效果就较好。先把细胞放在高渗溶液中(例如一定浓度的甘油或蔗糖溶液),由于渗透压的作用,细胞内的水分便向外渗出,细胞发生收缩,当达到平衡后,将介质快速稀释或将细胞转入水或缓冲液中,由于渗透压发生突然变化,胞外的水分迅速渗入胞内,使细胞快速膨胀而破裂。用此法处理大肠杆菌时,可使磷酸酯酶、核糖核酸酶的脱氧核糖核酸酶等释放至溶液中,蛋白质释放量一般仅为菌体蛋白总量的4%~7%。
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