[速览]5﹒蛋白质

1986年Damerval等人发展了一种对植物样品的酸化抽提／沉淀过程，用来提高蛋白质浓度和去除酚类物质。PI值大于7的蛋白质在酸性环境中能比在缓冲裂解中得到更多的提纯量。在对这些方法改进的基础上，人们已成功的提纯了小鼠肝脏、原始粒细胞、人心脏、酵母细胞中的一些重要蛋白，现在运用2D提纯试剂盒，这个过程已经缩短至可以过夜完成。将蛋白质样品置于1.5ml微离心管中，所有的步骤须在冰盒中进行。提示：微离心管的管盖铰链处应始终朝外，如此蛋白小球可始终处于管壁的同一位置，以此减少损失。将10mg研磨得到的粉末溶于300μl-20℃的沉淀剂中,混匀。离心12000g, 5min，去除一切不溶物质，去除泡沫，上清可直接用于IEF或保存于－ 80℃。