取健康合格、同一来源、同一性别、出生日期相近的成年小鼠,体重相差不得超过4 g。从小鼠放入恒温箱时开始,注意观察90分钟,记录各组发生阳性反应的鼠数。90分钟后,逐只检查所有未发生惊厥反应的小鼠,如有死亡、后肢麻痹不能正常行动或使其仰卧后3秒钟内不能自行翻身者,均认为是阳性反应。本法的可信限率FL(%)不得大于30%。