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[治疗](二)细胞标本的制备

除脑片膜片钳和盲膜片钳法之外,实验所需标本均为具有生物活性的离体细胞,其来源包括急性分离、原代和传代培养,具体方法在此不再赘述。在许多组织(如肝、胰外分泌腺、肾髓质)低钙或无钙液的冲洗有助于细胞与细胞之间联接的分离。在心肌应注意无钙液中游离钙浓度必须低于10 - 5mol/L,因为过多的钙存在时,应用胶原酶或蛋白酶会引起心肌细胞膜破裂。酶解消化的酶可根据动物种类和组织不同予以选择,如通常分离大鼠心肌细胞采用胶原酶,而分离豚鼠心肌细胞采用蛋白酶。为防止酶解消化时引起心肌损伤,常在酶溶液中加入纯化的小牛血清白蛋白作为“保护剂”。最后,清洗细胞以中止酶对细胞的作用,反复离心替换上清液后保存待用。

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——《离子通道药理学》
书名:《离子通道药理学》
栏目:离子通道药理学 > 第一篇 概论 > 第二章 离子通道的研究方法 > 第三节 膜片钳技术 > 四、膜片钳实验方法
作者:杨宝峰
参编:李宝馨,李玉荣,徐长庆,王志国,王玲
页码:33
版本:1
出版时间:2005-03-01
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