二、DNA纯化及其纯度测定

由于不同的实验要求，粗提取的DNA需分离纯化去除蛋白质等杂质以便后续实验。DNA纯化的方法有酚氯仿抽提法、超速离心法、柱色谱、分子杂交、免疫沉淀、凝胶电泳等，在此我们仅介绍酚氯仿抽提法。交替使用酚、氯仿这两种不同的蛋白质变性剂，以增加清除蛋白质杂质的效果，氯仿还能加速有机相与液相分层。在氯仿中加入少许异戊醇可以减少蛋白质变性操作中产生的气泡，最后通过氯仿抽提以清除核酸溶液中少量的酚。当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时，会影响DNA吸光度的准确测定。设定紫外光波长,分别测定。RNA样品的浓度（μ g／μ l）：OD260 ×稀释倍数× 40／1000.