[解剖学&组织学]（三）RT‐PCR法

PT‐PCR是近年来应用日益增多的一种m RNA的分析方法，灵敏度比Northern分析法大大提高，可检测＜ 1ng总RNA、104个细胞乃至单个细胞，因此特别适于检测低丰度表达的基因或来源有限的基因，该法比较快速省时，并且避免放射线核素污染。PCR实际上是一个在模板DNA、引物（模板片段两端的已知序列）和四种脱氧核苷酸等存在的情况下，DNA聚合酶依赖的酶促合成反应，扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。退火:突然降温后模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合,也存在两条模板链之间的结合，但由于引物的主浓度、结构简单等特点，主要的结合发生在模板与引物之间。