BCA(Bicinchoninic acid)是对一价铜离子敏感、稳定和高特异活性的试剂。在碱性溶液中,蛋白质将二价铜(Cu2 +)还原成一价铜(Cu +),后者与测定试剂中BCA形成一个在562nm处具有最大光吸收的紫色复合物。复合物的光吸收强度与蛋白质浓度呈正比。试剂A1%BCA二钠盐,2%碳酸钠,0.16%酒石酸钠,0.4%氢氧化钠和0.95%的碳酸氢钠,混合后,用50%氢氧化钠或固体碳酸氢钠调pH11.25。待测样品100 μ l,如上测定,从标准曲线上查出相应的蛋白质含量,或根据直线回归方程计算出样品的蛋白含量。100、4M盐酸胍、3M尿素对测定均无影响。
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