[文献资料]三、显微注射法制备转基因小鼠技术

将构建好的DNA酶切，切去原核载体部分，回收纯化线状的DNA片段，确保目的片段不含盐、有机溶剂和痕量琼脂糖。外源基因的整合率具有浓度依赖性，但受精卵存活率与DNA浓度呈负相关。作供体母鼠的种系自然产卵数与超排卵数均应较高。母鼠采取颈椎脱臼法处死，打开腹腔，用镊子夹住子宫与输卵管连接处，先剪断卵巢与输卵管连接处，再剪断子宫与输卵管连接处，得到输卵管，将其置于培养液中，在解剖镜下找到膨胀壶腹部，撕开取卵。也可以体外培养至胚泡期然后对同步发情的假孕母鼠作子宫移植。