[文献资料]四、正铁血红蛋白分光光度法

还原型Hb ［ Hb（Fe2 ＋）］可被NO快速（＜ 100ms）氧化成正铁Hb ［ Met‐Hb（Fe3 ＋）］，Hb（Fe2 ＋）吸光曲线峰值的波长在433nm，Met‐Hb（Fe3 ＋）吸光曲线峰值的波长在406nm，但二者在411nm处的吸光度相同（isobestic point）。因此以411nm的等位吸光度为基准，测定406nm或433nm处吸光度的增加或减少值，可动态实时监测NO形成的时间过程。氧合血红蛋白（HbO2）的曲线峰值在416nm，与上述等位吸光度的波长411nm接近，而且NO与Hb的亲和力远高于O2与Hb的亲和力，因此溶液中存在的HbO2对NO测定无明显影响。注意每分钟吸光值可以任意选择时间间隔,但必须是1分钟内。