此方法用[ 3H ]甘氨酸作为放射性配基评价化合物对NMDA受体复合物甘氨酸结合位点的亲和力。甘氨酸(5×10-2mol/L)用1.0ml蒸馏水溶解3.755mg甘氨酸(Sigma G7126),分装,每次取20 μ l至反应管中,使其终浓度为10nmol/L。甘氨酸购自New England Nuclear,比活度为45~50Ci/mmol。雄性Wistar大鼠,冰上分离皮层,加15倍体积冰冷的0.32mol/L蔗糖溶液匀浆(Tissumizer 70档30s)。20 μ l甘氨酸,终浓度10 - 3mol/L,或蒸馏水或适当浓度的抑制剂.用存在与不存在10 - 4mol/L甘氨酸结合之差来确定特异性结合,典型者为总结合的60%~70%,用log‐probit作图法计算竞争性药物的IC50值。
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