从小鼠颌下腺中分离的NGF有7S NGF,NGF及2.5S NGF。一般来说,7S NGF的产量约为β NGF的10倍,且其对原代交感神经细胞的营养作用是最强的。在整体实验中,给新生大鼠长期注射7S NGF 1 μ g/g体重,导致的动物死亡率达25%~50%。故7S NGF通常用于体外生物学试验或在体短期试验。含重组α和γ亚单位的β NGF可通过在酸性条件下透析7S NGF获得。将7S NGF在4倍体积的0.05mol/L醋酸钠缓冲液(pH4)中透析过夜,此时NGF各亚单位分离。将透析液加入经醋酸钠缓冲液平衡的Sephadex 50‐CM羧酸甲酯纤维素柱子,流速为20ml/h。最后将β NGF透析浓缩至1~2mg/ml,于- 20℃储存。
……