通过化学反应或免疫反应,使酶与抗体结合,其结合的产物为酶标抗体。采用改良过碘酸钠氧化法,以辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体。HRP含18%碳水化合物,酶的糖链部分与酶的活性无关,用过碘酸钠将酶表面糖分子的羟基氧化为醛基,醛基的化学性质活泼,可与抗体分子的氨基结合,形成按克分子比例结合的酶标记物,然后用NaHB4还原即成酶标记的抗体。1 ﹒称取4mg辣根过氧化物酶(HRP)溶于0.8ml三蒸水中,加入新鲜配制的0.1mol/L NaIO4 0.2ml,轻摇20min,使HRP充分氧化,肉眼可见液体由棕黄色变成深绿色。
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