[文献资料]二、体外培养细胞中神经营养因子活性的测定

在体外培养的细胞中加入神经营养因子，除了上述神经突起的定量测定外，常用的是根据细胞的生存率来判断营养因子的活性强度。下面介绍几种常用的测试细胞存活功能及生存率的方法。加入神经营养因子，作用6～9d后，吸去原培养基，用生理盐水洗一遍。必须注意的是，台盼蓝染料对细胞是有毒性的，因此其在细胞的作用时间不能超过10min。细胞膜完整、致密的细胞具有排斥染料的特性，而死细胞则因染料充填呈蓝色。在显微镜下，活细胞具折光性，有清晰的细胞轮廓。分别计算活细胞和死细胞数，活细胞数占总细胞数的百分比为细胞存活率。影响此方法的主要因素有血清，pH，细胞密度及胰蛋白酶的消化作用等。