利用已知含量的标准品测出其[ 3H ] 1,4,5‐IP3结合减少的标准曲线,并由此测算出未知样品中1,4,5‐IP3的含量。可以测到1,4,5‐IP3的浓度是0.2pmol/L。每测定管加本液25 μ l。取100 μ l原液加入5400 μ l水中,每测定管加入25 μ l稀释的[ 3H ] 1,4,5‐IP3溶液。滤膜进行液闪测定。非特异结合管(NSB)中加入25 μ l 4pmol/L的1,4,5‐IP3溶液,使全部受体都与标准品结合而不与[ 3H ] 1,4,5‐IP3结合。一般情况下,得到一条标准曲线之后,最好计算一下非特异结合与每管总同位素计数的比值NSB/TC。或者说明受体蛋白制备物的质量存在问题。
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