主要用于治疗恶性贫血,亦与叶酸合用用于治疗各种巨幼细胞贫血、抗叶酸药引起的贫血及脂肪泻。尚用于神经系统疾病(如神经炎、神经萎缩等)。治疗神经系统疾病时,用量可酌增。对恶性肿瘤患者可促进肿瘤生长。遇维生素C、重金属盐类均能使之失效。应避免与氯霉素合用,否则可抵消维生素B 1 2具有的造血功能。体外实验发现,维生素C可破坏维生素B 1 2。同时给药或长期大量摄入维生素C时,可使维生素B 1 2血浓度降低。氨基糖苷类抗生素、对氨基水杨酸类、苯巴比妥、苯妥英钠、扑米酮等抗惊厥药及秋水仙碱等可减少维生素B 1 2从肠道的吸收。考来烯胺可结合维生素B 1 2,减少其吸收。
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