可分裂细胞在体外生长一段时间(3~7天),细胞逐渐铺满底物表面,应将细胞分开接种至2个或更多培养物中,即为再培养或传代培养(subcul‐ture)。传代生长后,便成为细胞系(株)。细胞系在体外存活都有一定的时间,一般为20~50代。再培养细胞保持双倍体及来源细胞的很多特性,但反复传代后,将逐渐失去二倍体性质,细胞增殖变慢至停止分裂,进入衰退期。当神经胶质细胞或细胞系细胞生长至单层混合(confluence)时,必须传代或再培养,否则细胞会因无繁殖空间或营养消耗而影响生长,导致细胞脱落死亡。用培养液稀释后接种,密度以106/ml为宜,进行细胞的再培养。
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