（四）组织器官的细胞分离方法

组织器官的细胞分离方法一般有非酶分离技术和酶法分离技术，前者有机械分离法（如组织研磨法、不锈钢挤压法、吹打分离法）和EDTA分离法，后者有胰蛋白酶消化法和胶原酶消化法等。计数活细胞百分率,计算细胞数，用含4%小牛血清的PBS或Hank液制备所需浓度的细胞悬液（加小牛血清不仅可以作为稳定剂，抑制分散的细胞凝聚，也可作为酶抑制剂，抑制与细胞表面结合的胰蛋白酶的消化作用）。胶原酶有多种类型，如Ⅰ～Ⅴ、Ⅶ、Ⅺ等，分别适用于分离肝细胞、胰岛细胞、脂肪细胞、一般纤维组织等。该酶的作用缓慢，常需较长的消化时间，所用器材和试剂应按组织细胞培养的要求处理。