[概述]一、PCR的原理和基本要素

PCR的原理和细胞内发生的DNA复制过程十分相像。然后引物与单链DNA复性，在DNA聚合酶的作用下，以单链DNA为模板，并利用反应体系中的四种脱氧核苷三磷酸合成新的DNA互补链。由于新合成的DNA是由体系中加入的一对寡核苷酸引物在模板DNA链两端的退火位点所决定的，因此PCR能够扩增特定的DNA序列，这是PCR的第一个特点。这样经过几次循环以后，反应体系中的目标DNA序列就可被大量扩增，即特定的DNA片段得到了迅速大量的扩增，这是PCR的第二个特点。尽管模板DNA长度不是PCR反应的关键因素，但在使用高分子量的DNA（＞ 10kb）作模板时，如使用限制性内切酶先行消化（所选择的酶不能切割靶序列），扩增效果会更好。