二、放射免疫测定法

内啡肽的放射免疫测定法是脑啡肽发现后发展起来的一类内啡肽微量测定法。采用不同的标记物和抗血清可以特异性地测定微量生物样品中各种内啡肽的含量。现以亮氨酸脑啡肽（L‐ENK）为例，介绍测定方法。试管内如果同时存在内啡肽抗血清（Ab）、标记内啡肽（＊ Ag）及非标记内啡肽（Ag）时，Ag、Ag必须要竞争Ab上的特异件结合点,从而出现如下反应：AgAb → Ag ＋ Ab ＋ ＊ Ag → AgAb。由下式求出结合率（B%）：标准曲线制作和样品测定:由于放射免疫测定的批间差异较大，因此每次测定未知样品都要同时制作标准曲线。8）然后根据各测定管的B%值在标准曲线上求出相应的L‐ENK含量。