二、外源基因在真核细胞的表达

在真核细胞中表达蛋白的步骤比大肠杆菌复杂得多。但有的蛋白并不适合于分泌表达，如一些胞质蛋白、非糖基化蛋白等。转染前24h,通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1 × 105～4 × 105细胞／c m2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿或12孔板上。在磷酸钙‐DNA沉淀物的存在下用氯喹处理细胞或者吸去沉淀溶液后将细胞暴露于甘油与丁酸钠中会促进细胞吸收DNA。C ﹒在用氯喹孵育细胞后，移去培养基，用磷酸盐缓冲液洗涤细胞，加5ml预热的完全培养基。2）再次进行细胞传代，按照免疫染色合适的密度0.8 × 105个细胞／35mm培养皿将细胞重新放入培养皿中。