二、GST pull‐down实验

GST（glutathione sulfhydryl transferase，谷胱甘肽巯基转移酶）pull‐down assay是一种行之有效的验证蛋白质间相互作用的体外实验技术，其基本原理是将靶蛋白‐GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支撑物。充当一种“诱饵蛋白（bait protein）”，当蛋白溶液过柱时，可从中结合与之相互作用的“捕获蛋白（prey protein）”，洗脱结合物后通过SDS‐PAGE电泳分析，从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白。诱饵蛋白”和“捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。