[速览]二、蛋白质中胱氨酸和胱氨酸残基的定位

半胱氨酸和胱氨酸（二硫化物）间的氧化还原平衡在特定蛋白的氧化还原活化或在稳定蛋白质三维结构方面都起着重要作用。Wu等使用2‐硝基‐5‐硫氰苯甲酸（NTCB）进行化学修饰，测出游离半胱氨酸和胱氨酸基团的数目和位置。修饰的半胱氨酸残基的N‐端肽键可在碱性条件下用三（2‐羧乙酸）盐酸膦切下，以形成一个氨基酸端肽以及一系列2‐亚氨基噻唑‐4‐羧肽，然后用MALDI‐TOF‐MS进行测定。在还原状态下，重复以上实验即可确定半胱氨酸残基总数。Denslow等报道了束缚在PVDF膜上的蛋白的切割过程，用NTCB氰基化半胱氨酸残基后切割，再用MALDI‐TOF‐MS测定所得片段的质量。