利用黄热病毒可使细胞发生病变的作用,将供试疫苗以一定稀释度接种于单层细胞,在适宜的培养基中培养后,于单层细胞发生病变部分借助染料可显示无色空斑(蚀斑),由蚀斑形成单位(PFU/ml)以评价病毒滴度。细胞经胰酶消化后,用含10%小牛血清的199培养基制备成含约0.8× 10 5个/m l的细胞悬液。取供试品疫苗,用含5%小牛血清的199培养基作4倍系列稀释,至少作3个稀释度。选取3个适宜稀释度的供试品病毒液接种于培养板,每稀释度接种2孔,每孔0.4ml。计算举例见表:取30个以内的两个稀释度的蚀斑数,则0.4ml 1/163840稀释度的平均蚀斑数为:即。细胞悬液及供试品病毒稀释液配制后应立即使用。
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