该药抗菌活性强,具有广谱抗菌作用,不仅对革兰阴性菌有抗菌活性,对革兰阳性菌(包括MRSA、MRSE)、厌氧菌(包括脆弱类杆菌),以及支原体、衣原体等也具有较强的抗菌活性,对许多临床常见耐氟喹诺酮类菌株也具有良好杀菌作用。西他沙星本身无抗真菌作用,但与两性霉素B、氟康唑、咪康唑等抗真菌药有明显协同作用。