答:纸片扩散法又称琼脂扩散法,方法是将受试菌均匀地接种至琼脂培养基,将浸透药物的纸片放置在琼脂培养基表面,经过一定时间(依据受试菌的生长速度而定)的培养后通过抑菌圈的直径确定抗真菌药物的活性。为满足临床药敏试验的需要,CLSI于2003年起草了 《酵母菌的纸片扩散法抗真菌药物敏感试验参考方案》 (M44-P),并于2004年修订出版(M44-A),对试验方法、判定标准及质控菌株对氟康唑、伏立康唑的药敏结果数值范围进行了说明。试验方法如下:将受试菌株接种于血琼脂或沙氏葡萄糖琼脂培养基,35℃培养,用0.85%盐水配制0.5麦氏比浊度菌液,棉签浸湿所配制菌液,在试管内壁面上方通过旋转棉签挤出多余的菌液,均匀涂布至亚甲蓝M-H琼脂平板培养基上,待表面干后贴上抗真菌药物纸片,24~48小时后测量抑菌圈的直径。纸片扩散法相对于其他方法操作简单、使用方便、成本低、容易掌握,不需要复杂的设备,因此,适合在临床实验室常规开展。

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