答:ELISA检测需要设置阳性对照孔和阴性对照孔以保证实验的准确性,如:用夹心法和间接法ELISA测定时,阳性对照孔应该显色,阴性对照孔应该无色;竞争和竞争抑制法ELISA中阳性对照孔应该无色,阴性对照孔应该显色,若两种对照均显色或均不显色,提示实验存在差错,该次检测结果无效。另外,对照孔也是确定cut-off值的依据,夹心法中待检物A值大于阴性对照A值的2.1倍为阳性;竞争法中待检物A值小于阴性对照A值的1/2为阳性。对照物中除了有或无待检的抗原(或抗体)之外,其余成分应该与待检物相同,例如检测人血清中抗原或抗体,对照物最好也用原倍的人血清配制,若用含10%小牛血清PBS替代,则对照孔的酶标记物非特异性吸附会比待检孔高。

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