（六）实时PCR

这里描述一般方法，PCR产物通过SYBR Green掺入用荧光检测。标准的反应体系:反应体系也可用10 μ l，模板和引物的含量取决于目的基因在样本中的量。对于温度和循环数,一般用引物特异性的解链温度和最初的激活温度（94℃，10分钟）两步法（没有延伸这一步）。对细胞因子基因和看家基因进行一系列的稀释,用实时PCR进行扩增，制定标准曲线。在相同的条件下行普通PCR反应,以确定实时PCR中模板的合适用量。根据标准曲线用Ct值计算量。任何RT‐PCR测量稳定状态的mRNA水平，例如，量的不同只能在诱导／抑制m ......