[文献资料]（六）数字PCR（digital PCR)

数字PCR被认为是第三代PCR技术，它可以直接对目标分子进行计数，是一种绝对定量的PCR方法。由于每个拷贝的DNA分子都单独进行反应，混杂在大量野生型中的突变也可以产生一个非常明显的突变信号，从而使其灵敏度很高，可以检测到低至一个拷贝的突变。不同于传统的荧光定量PCR ，该方法不需要制作标准曲线，不进行Ct值的计算，不受扩增效率的影响，通过泊松分布统计，直接对每个反应室的产物进行定量分析，是一种误差较小的绝对定量方法。原始的数字PCR操作较为复杂，通过引入BEAMing （珠子，乳液，扩增，磁性)技术后，可以将原来分散于微孔板中的反应转移成油包水反应液滴。