二、DNA Ladder测定

凋亡细胞的内源性核酸内切酶被激活，选择性降解染色质DNA，使其形成核小体连接处断裂、大片段DNA链的断裂及DNA单链的断裂。最多见核小体之间DNA的断裂，形成180～200bp或其整倍数的DNA片段，这些DNA片段可从细胞中提取出来，通过琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色呈现为梯状DNA条带（DNA ladder）。于2%琼脂糖凝胶（含0.5 μ g／ml溴化乙锭）中，每孔加入与1／6体积的6 ×上样缓冲液（4 μ l）相混匀的上清DNA样品（20 μ l），于1 × TAE缓冲液的电泳槽内，按2～4V／c m低电压电泳（促进DNA片段分离），染料泳动至胶2／3处结束电泳。EB为强致癌剂，操作时戴手套，注意局部环境的EB污染防护。