在琼脂板掺入适量抗体,于电场的作用下,定量的抗原在含抗体的离子琼脂中泳动,当比例适当时,短时期内即出现锥形沉淀线,形似火箭,Apo含量愈多则箭峰愈高,从而可与标准曲线比较,计算其含量。制备大鼠ApoA‐Ⅰ:先用超速离心法制备大鼠血清HDL,再用甲醇/氯仿脱脂,经Sephade XG‐200柱色谱,得纯化ApoA‐Ⅰ。冷却后打孔(直径4mm,孔距6mm),按排列每孔内注入适当稀释度的待测血清或标定血清5 μ l,在正负极搭滤纸片,通电10V/cm,每块琼脂板电流40mA,24h后取下琼脂板,用生理盐水浸泡1~3天,洗去未结合的抗原及抗体,最后干燥脱色。测量各峰值,对照标准曲线计算ApoB‐100的含量。
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